基因擴增（PCR）實驗室設(shè)計方案

臨床基因擴增實驗又稱PCR實驗，是專門用來檢驗艾滋病、乙型肝炎、禽疫病等病毒感染性疾病的一種檢測手段。它可以通過將病毒體內(nèi)所含的基因進行擴增的方法，測出一些病毒含量不高的感染者體內(nèi)是否含有特定的病毒。由于該檢測方法可以測出普通檢驗難以檢測出的病毒并具有靈敏度高、特異性高、快捷、對樣品要求低等優(yōu)點，因此被臨床醫(yī)生廣為認可，已廣泛應用于醫(yī)院的臨床診斷和各防疫檢測部門的禽疫病診斷。

【基因擴增實驗室（PCR）概述】

近年來對臨床基因擴增檢驗實驗室的建設(shè)越來越得到重視，因為它對檢測結(jié)果的可靠性、準確性和安全性起到至關(guān)重要的作用。本文主要從臨床基因擴增檢驗實驗室的平面布局，空調(diào)通風系統(tǒng)設(shè)計、氣流控制和污染的防制幾個方面對實驗室設(shè)計中的主要特點進行了闡述。臨床基因擴增檢驗實驗室設(shè)計的核心問題是如何避免污染。因此，實驗室設(shè)計依據(jù)、實驗室的平面布局、實驗室裝飾材料的選擇、空調(diào)通風系統(tǒng)設(shè)計、氣流控制等都是圍繞這個核心問題進行的。下面就對這幾個方面分別進說明。

【基因擴增實驗室（PCR）設(shè)計依據(jù)】

《醫(yī)療機構(gòu)臨床基因擴增管理辦法》

《生物安全實驗室建筑技術(shù)規(guī)范》

GB50346-2004 《潔凈廠房設(shè)計規(guī)范》

GB50073-2001 《高效空氣過濾器》

GB13554-92 《實驗室生物安全通用要求》

GB1989-2004 《微生物和生物醫(yī)學實驗室生物安全通用準則》WS233-2002

【實驗室布局設(shè)計】

臨床基因擴增檢驗實驗室原則上分為四個單獨的工作區(qū)域：試劑貯存和準備區(qū)、標本制備區(qū)、擴增反應混合物配制和擴增區(qū)、擴增產(chǎn)物分析區(qū)。為避免交叉污染，進入各個工作區(qū)域必須嚴格遵循單一方向進行，即只能從試劑貯存和準備區(qū)→標本制備區(qū)→擴增反應混合物配制和擴增區(qū)→擴增產(chǎn)物分析區(qū)。各實驗區(qū)之間的試劑及樣品傳遞應通過傳遞窗進行。

【實驗室裝飾材料】

實驗室設(shè)計為全封閉空間，空間四周及上層均為50mm厚手工彩鋼板結(jié)構(gòu)，填充物為阻燃材料，主體顏色為啞白色，門窗玻璃為50mm厚雙層中空鋼化玻璃嵌入手工彩鋼板卡槽內(nèi)，如采用機制彩鋼板為防止沉積灰塵，窗料使用R25MM鋁合金圓弧壓線。

所有二維連接處的內(nèi)側(cè)均使用R50MM鋁合金內(nèi)圓角，暴露在外的二維連接線的外側(cè)則用R100MM鋁合金外角連接;彩鋼板的三維連接處使用三維接點過度，而彩鋼板與墻角地面則用鋁合金槽連接。

吊頂材料亦為彩鋼板，地面為環(huán)氧樹脂材料，具有無縫隙、耐腐蝕、平整、容易清洗的特征。地面地腳線用陰角鋁材裝飾，美觀且嚴密性好。整個實驗室內(nèi)應形成堅固、無縫、平滑、美觀、不反光、不積塵、不生銹、防潮、抗菌、性能優(yōu)良的無菌表面和內(nèi)殼。基因檢測實驗室入口設(shè)置有門禁和實時攝像頭，可有效控制非授權(quán)人員的進入。

【通風壓力控制】

基因擴增（PCR）實驗室并沒有嚴格的凈化要求，但是為避免各個實驗區(qū)域間交叉污染的可能性，宜采用全送全排的氣流組織形式。同時，要嚴格控制送、排風的比例以保證各實驗區(qū)的壓力要求。

（一）試劑貯存和準備區(qū)該實驗區(qū)主要進行的操作為貯存試劑的制備、試劑的分裝和主反應混合液的制備。試劑和用于標本制作的材料應直接運送至該區(qū)，不得經(jīng)過其他區(qū)域。試劑原材料必須貯存在本區(qū)內(nèi)，并在本區(qū)內(nèi)制備成所需的貯存試劑。對與氣流壓力的控制，本區(qū)并沒有嚴格的要求。

（二）標本制備區(qū)該區(qū)域主要進行的操作為臨床標本的保存、核酸(RNA、DNA）提取、貯存及其加入至擴增反應管和測定RNA時cDNA的合成。本區(qū)的壓力梯度要求為：相對于鄰近區(qū)域為正壓，以避免從鄰近區(qū)進入本區(qū)的氣溶膠污染。另外，由于在加樣操作中可能會發(fā)生氣溶膠所致的污染，所以應避免在本區(qū)內(nèi)不必要的走動。